Phân tích đạm theo phương pháp Kjeldahl - Thiết bị phân tích phòng thí nghiệm H2TECH

Phân tích đạm theo phương pháp Kjeldahl

Phương pháp kjeldahl là gì?

Phương pháp Kjeldahl trong hóa học phân tích là phương pháp xác định định lượng nitơ chưa trong các chất hữu cơ cộng với nitơ trong amoni vô cơ và amoni.

Xác định hàm lượng protein bằng phương pháp Kjeldahl là phương pháp mang lại kết quả chính xác.

Trước đây, phân tích đạm tổng số bằng phương pháp thủ công, sử dụng bình Kjeldahl, các hóa chất cần thiết và bộ chưng cất đạm Kjeldahl bằng thủy tinh.

Trong thời kỳ hiện đại, rất nhiều máy phá mẫu đạm Automatic được sản xuất.

Máy chưng cất dạm Kjeldahl tự động k1100F - Hanon

Nguyên lý phương pháp chưng cất đạm Kjeldahl

Phương pháp xác định đạm bao gồm sưởi ấm một chất với axit sulfuric, phân hủy các chất hữu cơ bằng quá trình oxy hóa để giải phòng lượng nitơ giảm như amoni sulfat. Trong bước này, kali Sunphat (K2SO4), và Đồng Sunphat (CuSO4.5H2O) được thêm vào để tăng điểm sôi của môi trường (từ 337 ° C đến 373 ° C)

Sự phân hủy hóa học của mẫu hoàn tất khi môi trường ban đầu rất tối đa đã trở nên rõ ràng và không màu. Dung dịch này sau đó được chưng cất với một lượng nhỏ Natri Hydroxyd, chuyển muối amoni thành ammonia. Lượng amoniac hiện diện và do đó lượng nitơ có trong mẫu được xác định bằng phép chuẩn độ. Sự kết thúc của bình ngưng được nhúng vào một dung dịch axit boric hoặc axit sulfuric. Amoniac phản ứng với axit và phần còn lại của axit sau đó được trung hòa bằng NaOH 0.1N

a. Giai đoạn phá mẫu: Mẫu + H2SO4 → (NH4)2SO4 (aq) + CO2 (g) + SO2 (g) + H2O (g) 

b. Giai đoạn chưng cất giải phòng Amoniac: (NH4)2SO4 (aq) + 2NaOH → Na2SO4 (aq) + 2H2O (I) + 2NH3 (g)

c. Hấp thụ  Amoniac: B(OH)3 + H2O + NH3 → NH4 + B(OH)4 

d. Phản ứng ngược: B(OH)3 + H2O + H2SO4 → NaHCO3 (aq) + NaB(OH) 4 (aq) + CO2 (g) + H2O

Thao tác phân tích đạm

Hóa chất cần dùng: H2SO4, CuSO4, K3SO4, NaOH 40%, chất chỉ thị màu, ống chuẩn NaOH 0.1N, ống chuẩn H2SO4 0.1N.

Cách phân biệt hóa chất: 

1. Hổn hợp xúc tác: Cân trước 1g CuSO4 và 10g K2SO4 .

2. Chất chỉ thị màu: 0.25g Methylene blue + 0.5g Methylred + 50ml Ethanol.

3. Dung dịch NaOH 40% : Cân 404g NaOH (99.9%) vào bình định mức 1 lít, dùng bình tia tráng sạch lên thể tích vừa 1 lít.

4. Chất chỉ thị màu: Cân 0.25g Methylene blue + 0.5g Methyl red sau đó thêm 50ml Ethanol.

5. Pha dùng dịch chuẩn: NaOH 0.1 N và H2SO4 0.1 N. Lấy một ống chuẩn vào binh đinh mức, dùng bình tía tráng cho sạch sau đó đổ thêm nước cất vừa đủ 1 lít.

Hướng dẫn các thao tác: 

a. Giai đoạn phân hủy.

Bước 1: Hút 1ml nước mắm cho vào bình phá mẫu Kjeldahl.

Bước 2: Cho thêm 15ml H2SO4 95 - 97%.

Bước 3: Thêm hổn hợp xúc tác CuSO4 và K2SO4 .

Để bình Kjeldahl khoảng 10 - 15 phút cho mẫu đồng đều, sau đ đốt đến khi nào dung dịch thu được màu vàng hoặc xanh trong suốt.

b. Giai đoạn chưng cất

Bước 1: Hút 10ml dung dịch H2SO4 0.1N và 2 giọt chỉ thị màu vào bình tam giác 250ml hứng phần ngưng tụ.

Bước 2: Kiểm tra độ kín của hệ thống nước hoàn lưu. Lưu ý khóa tất cả các van khi chừng cất.

Bước 3: Chuyển toàn bộ mẫu ở bình Kjeldahl vào bình chưng cất, dùng nước tráng lại 3 lần.

Bước 4: Thêm 30 - 40ml NaOH 40% vào bình chưng cất.

Bước 5: Tiến hành chưng cất. Chờ bình tam giác ngưng tụ được khoảng 200ml.

Bước 6: Rửa đuôi ống sinh hàn bằng nước cất sau đó cất thêm 1 phút nữa.

c. Chuẩn độ.

Bước 1: Điền đầy Buret 25ml với dung dịch NaOH 0.1N pha sẵn.

Bước 2: Mang bình tam giác vừa ngưng tụ chuẩn độ bằng dung dịch NaOH 0.1N đến khi dung dịch chuyển từ màu xanh lục sang màu tím. Ghi thể tích NaOh 0.1N tiêu tốn.

d. Tính toán ( Phương pháp tính Nitơ toàn phần)

Hàm lượng Nitơ toàn phần được tính theo công thức sau: 

Trong đó: 

V1 : Thể tích dung dịch NaOH 0.1N tiêu tốn trên Buret.

V2: Thể tích dung dịch H2SO4 0.1N.

N : Đương lượng dung dịch H2SO4 0.1N.

Vm: Thể tích mẫu thử (ml).

m: Khối lượng mẫu thử (g).

f: Hệ số pha loãng mẫu.

F: Hệ số hiệu chỉnh nồng độ dung dịch NaOH 0.1N (bằng 1).

V1 =             V2 = 10ml       N = 0.1N       Vm = 1 ml       f = 20 ml

Bài viết được sưu tầm và biên soạn bởi H2tech

CÔNG TY CP THIẾT BỊ KHOA HỌC H2TECH
Chuyên cung cấp các thiết bị phòng thí nghiệm - Thiết kế phòng lab
Chúng tôi hợp tác lâu dài dựa trên uy tín, chất lượng và hỗ trợ cho khách hàng một cách tốt nhất
Hotline: 028.2228.3019
Email: salesadmin@h2tech.com.vn
Webside: https://h2tech.com.vn
https://thietbihoasinh.vn